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記者從中科院合肥研究院了解到，該院安光所合肥研究院劉勇研究員、朱靈研究員與中國(guó)科技大學(xué)附屬第一醫(yī)院莢衛(wèi)東教授合作，共同研發(fā)了基于數(shù)字等溫?cái)U(kuò)增的miRNA檢測(cè)新技術(shù)，可用于肝癌miRNA分子標(biāo)志物的快速精準(zhǔn)檢測(cè)，有利于肝癌的早期診斷，提高患者的五年生存率。研究成果日前發(fā)表于《化學(xué)通訊》上。

我國(guó)每年新發(fā)肝癌約占全球一半以上，病死率在惡性腫瘤中位列第二位。肝癌起病隱匿，約80%的肝癌患者首診就已進(jìn)入晚期。晚期肝癌五年生存率幾乎為零，而早期肝癌經(jīng)治療，五年生存率可達(dá)60%。血清甲胎蛋白(AFP)是當(dāng)前診斷肝癌的常用指標(biāo)，然而約30%的肝癌患者AFP水平正常，易出現(xiàn)假陰性，造成漏診。國(guó)家衛(wèi)健委在《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2019版)》中已經(jīng)將循環(huán)游離miRNA作為新的分子標(biāo)記物納入肝癌的早期診斷，其敏感度和特異度分別可達(dá)86.1%和76.8%，大大提高了早期肝癌的診斷率。

miRNA是一類內(nèi)生的、長(zhǎng)度約為20-24個(gè)核苷酸的小RNA，需要在專業(yè)實(shí)驗(yàn)室由專門技術(shù)人員進(jìn)行分離純化、探針制備和擴(kuò)增檢測(cè)等復(fù)雜過程，目前采用的傳統(tǒng)反轉(zhuǎn)錄熒光定量PCR(qRT-PCR)是一種相對(duì)定量檢測(cè)方法，分析其表達(dá)水平還需要內(nèi)源性參照基因。

針對(duì)這一問題，研究團(tuán)隊(duì)提出了用于肝癌相關(guān)miRNA快速檢測(cè)的鏈置換數(shù)字等溫?cái)U(kuò)增新技術(shù)，設(shè)計(jì)開發(fā)了新型熒光自抑制探針，實(shí)現(xiàn)了miRNA的絕對(duì)定量檢測(cè)，提高了檢測(cè)靈敏度，解決了單樣本多靶標(biāo)檢測(cè)難點(diǎn)。團(tuán)隊(duì)相繼突破了微液滴高速制備與分發(fā)、高靈敏度實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)、高精度圖像識(shí)別分割與統(tǒng)計(jì)算法等關(guān)鍵技術(shù)，并聯(lián)合中國(guó)科技大學(xué)附屬第一醫(yī)院、中科院合肥腫瘤醫(yī)院開展臨床應(yīng)用研究，建立了基于甲胎蛋白和7個(gè)miRNA的肝癌早期診斷模型。

該項(xiàng)目研發(fā)的“數(shù)字PCR預(yù)混液試劑盒”獲得了一類醫(yī)療器械備案憑證，將在病原微生物檢測(cè)、腫瘤基因液體活檢、無創(chuàng)產(chǎn)前診斷等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。(科技日?qǐng)?bào)記者 吳長(zhǎng)鋒)